Luego de que se obtiene un resultado positivo por ANA Hep-2 es necesario confirmar el tipo de auto-anticuerpo presente en el suero del paciente.
El ENA multiparametro es un estupendo método confirmatorio para la detección de anticuerpos en contra de antígenos nucleares extraíbles del núcleo por ELISA.
Ventajas:
Permite la detección de Sm (Smith), RNP, SSA/Ro, SSB/La, Scl-70 y and Jo-1 de forma individual.
Es automatizable, permite el uso de lavadores semi y automáticos.
Incluye controles negativo y cut-off por paciente.
Facíl lectura con equipo Lector de ELISA (no sujeta a ningún tipo de subjetividad como en el caso de los inmunoblotts).
Excelente precio.
 
USO PREVISTO:
Se trata de un sistema de análisis inmunoenzimático (EIA) para la detección de anticuerpos contra los antígenos nucleares extraíbles Sm (Smith), RNP, SSA/Ro, SSB/La, Scl-70 y and Jo-1 en suero humano. Los resultados de esta prueba se pueden utilizar como complemento del diagnóstico de enfermedades autoinmunitarias.
Se trata de un EIA cualitativo indirecto. La superficie de los micropocillos ha sido recubierta con un preparado estabilizado de antígenos nucleares extraíbles purificados en función de su afinidad, que actúa como antígeno en este sistema. Se disponen muestras diluidas de los pacientes en los micropocillos, y se incuban permitiendo que los anticuerpos específicos de la muestra reaccionen con el antígeno de la fase sólida. Tras lavar para retirar el anticuerpo no ligado y otras proteínas del suero, se incuban los pocillos con anticuerpos humanos de cabra, marcados con peroxidasa de rábano. El preparado de anticuerpos conjugados con peroxidasa de rábano que se incluye en sistema de evaluación es específico de las cadenas ligeras y pesadas de la IgG humana. Tras la incubación con los conjugados de peroxidasa de rábano, y si los resultados son positivos, se forma un complejo estable con tres partes, a saber: Este complejo esta compuesto por anticuerpo antihumano conjugado con peroxidasa de rábano unido al anticuerpo anti-ENA humano, unido a su vez al antígeno estabilizado en la superficie de plástico. Tras otro paso de lavado, se detecta el complejo añadiendo una solución de tetrametilbenzidina (TMB) y H2O2 como sustrato cromógeno. El grado de aparición del color en cada pocillo es proporcional a la concentración de anticuerpos anti-ENA en cada muestra de suero. Cada micropocillo es analizado en un espectrofotómetro a 450 nm.